ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測,自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領(lǐng)域的長(cháng)足發(fā)展。ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗質(zhì)量,我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?
ELISA檢測試劑盒的17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:
1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)y以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。
12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。
15.在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。
16.吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。
17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。