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微生物實(shí)驗室里面的干粉培養基應該如何管理?

更新時(shí)間:2020-11-24      點(diǎn)擊次數:1984

    在微生物檢驗中,干粉培養基的質(zhì)量關(guān)乎微生物的檢驗結果。加強對培養基的質(zhì)量管理,能夠有效提升微生物檢驗結果的準確性和科學(xué)性,因此需要注重培養基的質(zhì)量管理工作。本文從培養基的采購驗收、質(zhì)量控制、培養基制備后的質(zhì)量控制以及培養基的滅菌和儲存等環(huán)節簡(jiǎn)要分析了培養基的質(zhì)量控制工作。

    01、干粉培養基供應商選擇

    培養基應當從可靠的供應商處采購,必要時(shí)應當對供應商進(jìn)行評估。評估應確定其生產(chǎn)工藝,運輸條件是否符合規定,資質(zhì)是否齊全,質(zhì)量保證能力和生產(chǎn)能力是否符合需求。如果新增培養基供應商,應對該廠(chǎng)家所生產(chǎn)的不同批次的培養基理化及微生物指標進(jìn)行檢測,并進(jìn)行審計評估,評估合格后才可以將該品牌納入合格供應商名錄。

    02、干粉培養基初步驗收

    在培養基到達實(shí)驗室后,應安排專(zhuān)業(yè)的人員對培養基進(jìn)行驗收,首先查看培養基的名稱(chēng)是否正確、配方是否符合藥典或國標等相應的法規文件的要求、是否臨近有效期、生產(chǎn)批號是否清晰、能否提供商品質(zhì)檢報告、檢查包裝是否完整,規格、數量是否與采購申請一致。在接收完畢后安排管理人員進(jìn)行入庫保存,并盡快安排對培養基進(jìn)行入廠(chǎng)檢測。

    03、培養基理化及微生物檢測

    培養基的理化指標主要包括pH值、澄明度以及凝膠強度(瓊脂類(lèi)),培養基的微生物指標一般包括:靈敏度、促生長(cháng)能力、抑制能力以及指示特性,即培養基適用性檢查。這些指標供應商在培養基出廠(chǎng)前就已經(jīng)進(jìn)行了檢測,合格后放行。使用單位驗收時(shí)仍需進(jìn)行培養基適用性檢查,并與廠(chǎng)家提供的質(zhì)檢報告進(jìn)行對比,看與報告內容是否一致。使用單位也可采用有資質(zhì)的第三方檢測報告。

    04、干粉培養基儲存

    對入庫保存的培養基應張貼標簽,以區分驗收與未驗收的培養基,避免混淆與差錯。在此為大家提供一個(gè)簡(jiǎn)單的標簽,僅供參考:

    使用單位存儲培養基時(shí)標簽也可以做編號處理,例如購進(jìn)100瓶TSB,產(chǎn)品號為11104,其編號為11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水號領(lǐng)用培養基,可減少對培養基的盤(pán)點(diǎn),方便管理。

    培養基的儲存條件一般為常溫、干燥、密閉,當然不同供應商的存儲條件稍有差別,按照標識執行即可。稱(chēng)量后應及時(shí)旋緊瓶蓋,避免后期存儲因空氣濕度較大受潮或結塊,如出現結塊現象,該瓶培養基不可繼續使用。

    培養基開(kāi)瓶后在稱(chēng)量和存儲的過(guò)程中會(huì )不可避免的吸收空氣中的水分,而水分含量的增加,培養基的微生物負載可能亦隨之增大,進(jìn)而影響到干粉培養基的質(zhì)量。所以干粉培養基在開(kāi)瓶后,應定期進(jìn)行復檢,并對復檢結果進(jìn)行統計分析,確定開(kāi)瓶有效期。

    如果實(shí)驗室所在地區濕度較大(相對濕度高于75%),開(kāi)瓶后的培養基應采取適宜的保護措施,如果數量較少,可放置于干燥器內,如果數量較多,可使用封口膜瓶口位置纏繞數匝。

    05、培養基配制--稱(chēng)量

    培養基的制備環(huán)節,應當嚴格按照培養基配方制備,在培養基的稱(chēng)量過(guò)程中,建議在干爽、無(wú)風(fēng)的區域或者通風(fēng)柜中進(jìn)行,這樣能夠避免培養基吸潮使稱(chēng)量結果不準。應當選擇靈敏度較高的稱(chēng)重天平,這樣能夠保證稱(chēng)量的準確性,同時(shí)稱(chēng)量過(guò)程中要選擇的稱(chēng)量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養基中。操作人員應當對稱(chēng)量過(guò)程進(jìn)行詳細的記錄,記錄中應該體現培養基名稱(chēng)、批號、稱(chēng)量數量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調查。

    06、培養基配制--容器和水

    配制培養基所用的容器不得影響培養基質(zhì)量,一般為玻璃容器,培養基配制所用的容器和配套器具應潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)殘留。在大體積配制培養基時(shí),企業(yè)也可根據自己的情況采用不銹鋼容器,建議專(zhuān)鍋,且容器應潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。

    培養基用水是培養基制備過(guò)程中非常重要的一個(gè)物質(zhì)。不可以使用自來(lái)水,自來(lái)水中的雜質(zhì)可能會(huì )對檢驗結果有一定的影響。許多法規在培養基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實(shí)際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優(yōu),所以不必單獨制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應按藥典的要求定期進(jìn)行檢測。

    在制備過(guò)程中,可先加入培養基,再將純化水倒入容器內,同時(shí)需要將器具內壁上的培養基粉末一同帶到容器中,然后根據說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。涉及到大體積配制后要分裝的培養基(例如TSA、TSB、FTM等),分裝前一定要將培養基加熱至*溶解,避免后續可能會(huì )出現的瓶間差異。

    07、培養基的滅菌

    培養基的滅菌過(guò)程是影響培養基質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節。大部分培養基需要高溫高壓濕熱滅菌,但部分選擇性培養基由于一些組分不可高溫高壓滅菌,所以會(huì )采用煮沸滅菌,因此滅菌前應閱讀培養基使用說(shuō)明。

    培養基滅菌應采用驗證過(guò)的滅菌程序,滅菌參數應通過(guò)無(wú)菌性試驗和促生長(cháng)試驗的驗證。此外,對高溫高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統也要加以驗證,以保證其在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導致培養基過(guò)度加熱,過(guò)度滅菌會(huì )影響絕大多數的細菌和真菌培養基的促生長(cháng)質(zhì)量。滅菌器中培養基的容積和裝載方式也會(huì )影響加熱的速度。因此應根據滅菌培養基的特性,進(jìn)行全面的滅菌程序驗證。

    煮沸滅菌的培養基建議現配現用,高溫高壓濕熱滅菌的培養基可以大量配制,在適宜的條件下儲存,固體培養基滅菌后只允許一次再融化。滅菌后培養基的儲存效期應進(jìn)行驗證。

    制備好的培養基,使用前需進(jìn)行pH的監測。對于固體培養基pH監測,可使用平頭電極或固液兩用電極。
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